1、缓慢移动原则：为了避免影响正常的风路状态，生物安全柜柜内操作时手应该尽量平缓移动。
2、物品平行摆放原则：为了避免物品和物品之间的交叉污染现象产生，在柜内摆放的物品应该尽量呈横向*字摆开，避免回风过程中造成交叉污染。同时避免堵塞背部回风隔栅影响正常风路。
3、避免震动原则：柜内尽量避免震动仪器（例如离心机、旋涡振荡器等）的使用，因为震动会使得积留在滤膜上的颗粒物质抖落，导致操作室内部洁净度降低，同时如果在前操作面平衡失败还会引起安全柜对操作者的污染。
4、不同样品柜内移动原则：柜内两种及以上物品需要移动时，*定遵循低污染性物品向高污染性物品移动原则，避免污染性高的物品在移动过程中产生对柜体内部的大面积污染。
5、明火使用原则：柜内尽量不要使用明火。因为在明火使用过程中产生的细小颗粒杂质将被带入滤膜区域，这些高温杂质会损伤滤膜。无法避免*定需要使用的时候，宜使用低火苗的本生灯。
